发酵过程中谷氨酸含量的测定
谷氨酸在发酵过程中是一种重要的代谢产物,在许多微生物的生长中扮演着重要的角色。下面介绍一种常见的谷氨酸含量测定方法:
试剂和设备:
- 2% ninhydrin 溶液
- 1% 碳酸钠溶液
- 硫酸铵
- 突出瓶
- 热块
步骤:
1. 将发酵液沉淀或离心,收集上清液。
2. 取一定数量的上清液(如10毫升),加入同体积的1%碳酸钠溶液,混匀。
3. 加入2% ninhydrin 溶液,再次混匀。
4. 将混合液倒入突出瓶中,加入一定量的硫酸铵(如1 ml)。
5. 热块加热20-30分钟,直到混合液变色为止。
6. 冷却后,用1%碳酸钠溶液调节pH值至7左右。
7. 将混合液吸入分光光度计,以546nm波长测定吸光度。
注意事项:
1. ninhydrin 是一种有毒化合物,需要注意安全操作。
2. 测定前需要去除发酵液中的蛋白质和其他干扰物质,如通过沉淀或离心等方法去除。
3. 测定结果需要与标准曲线相比较,以获得准确的谷氨酸含量。
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