菌种保存三种主要方法 菌种保存的方法有哪些
1、斜面低温保藏法:将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,等到菌种充分生长过后,使用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌,一般可以保存2-4个月左右,需要移种一次。如果是酵母菌,一般可以保存2个月左右,需要每个月移种一次。
2、液体石蜡覆盖保藏法:将液体石蜡装在三角烧瓶中,并使用棉塞塞好,用牛皮纸进行包扎,然后在0.1MPa,121.3℃的环境下灭菌30分钟左右,接着将其放置在40℃的温箱之中,将水汽蒸发掉。将需要保藏的菌种,用适合的斜面培养基进行培养,得到健壮的孢子或者是菌体。使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出,注入斜面上,用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。将试管直立,放置在低温或者是室温之下进行保存。霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死,酵母菌可以保藏1-2年,一般无芽孢细菌可以保藏1年,脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下)。
3、滤纸保藏法:准备好滤纸条(0.5×1.2cm),安瓿管(0.6×8cm),然后每个安瓿管放置1-2张滤纸条,塞上棉塞,在0.1MPa,121℃的环境下灭菌30分钟左右。将菌种在适合的斜面培养基上培养,得到健壮的菌体。在灭菌培养皿中滴加1-2ml的灭菌脱脂牛乳,并取数环菌苔在牛乳内混合均匀,制成浓悬液,然后使用镊子从安瓿管中取出滤纸条,浸入菌悬液中,吸饱后,放回安瓿管中,塞上棉塞。将安瓿管放入干燥器中(内有五氧化二磷作吸水剂),并用真空泵抽气至干。将棉花塞入管内,用火焰熔封,然后放置在低温环境下保存。
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